培養基配方
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念珠菌顯色培養基
Candida Chromogenic Medium


用途:用于念珠菌分離和鑒定,白色念珠菌顯綠色


應用范圍:念珠菌顯色培養基根據酶底物法,通過顯色來區別不同念珠菌,25-30℃培養48小時后,白色念珠菌顯綠色,熱帶念珠菌顯藍灰色,光滑念珠菌顯淡紫色至紫色,克柔假絲酵母菌顯紫粉色,其它念珠菌顯白色,細菌被抑制。

配方(g/L):
 
 胨 

  10.2 

 氫罌素

  0.2 

 色素 

 22.0 

 瓊脂

15.0 

 pH 6.3±0.2  25℃

此配方可以進行改良或增加營養成份以獲得最佳的結果。    

用法:

  稱取本品 9.7g(可按 4.85g/100ml 的比例擴大或縮。,加入 200ml 蒸餾水或純化水中,加熱溶解并不停攪拌,煮沸不要超過 1 分鐘。將加熱后的培養基水浴冷卻至 45-50℃,輕輕地搖勻,傾入無菌平皿(9cm 的 15ml/皿,7cm 的 10ml/皿),瓊脂完全凝固后,在超凈工作臺中開蓋吹15-30分鐘,備用。
操作步驟:
  1、按國家標準、 SN 標準、 FDA 標準或其它方法制備樣品液;
  2、取樣品液涂布或劃線接種于平板上;
  3、25-30℃培養48小時。白色念珠菌典型特征為綠色,熱帶念珠菌顯藍灰色,光滑念珠菌顯淡紫色至紫色,克柔假絲酵母菌顯紫粉色,其它念珠菌顯白色,細菌被抑制。
  4、對可疑白色念珠菌菌落可劃線接種到PDA瓊脂平板上,25-30°C培養24- -48小時,挑取單菌落做鏡檢和生化試驗。
質量控制:
  1、外觀
  此干燥培養基的粉末均勻,具有良好的流動性,呈淡黃色。制備好的平板呈淡黃色透明固態。
  2、微生物試驗
  在 25-30℃ 培養 48 小時:   

 質控菌株

 ATCC

 生長情況

 菌落顏色

 白色念珠菌

 CMCC98001

+++

 綠色

 熱帶念珠菌

 ATCC13803

+++

 藍灰色

 克柔假絲酵母菌

 ATCC14243

+++

紫紅色

光滑念珠菌

 ATCC15126

+++

 淡紫色-紫色

 其它念珠菌

 /

+++

 白色

大腸埃希氏菌

CMCC44102

-

-

方法的局限性:
  本培養基鑒定白色念珠菌,少數情況下可能會出現假陽性或假陰性,需做其它補充試驗。
典型特征:
  白色念珠菌典型特征為綠色,熱帶念珠菌顯藍灰色,光滑念珠菌顯淡紫色至紫色,克柔假絲酵母菌顯紫粉色,其它念珠菌顯白色,細菌被抑制。

貯存:

 制備好的平板應立即使用,應避免光線直接照射。干粉培養基應放置于陰暗干燥處, 保存溫度 2-8℃,注意避光保存。 
失效:
  干燥培養基超過保質期、結塊和顏色變化都不能使用。
注意:
  此培養基僅供實驗室使用。
參考文獻:
  1.Mega et al (J. Biochem. vol. 71, pp 107-114, 1972).   
  2.Bendel et al. XP-002064132 "Distinct Mechanisms of Epithelial Adhesion for Candida albicans and Candida tropicalis" vol. 92, Oct. 1993, pp. 1840-1849. 
  3.Mira-Gutierrez et al., XP-002064133 "Identification of yeasts by hydrolysis of amides" Nov. 8, 1994, pp. 101-106. Crist, Jr. et al., XP-002064134 "Comparison of the MUREX C. Albicans, Albicans/Sure, and Bacticard Candida Test Kits with the Germ Tube Test for Presumptive identification of Candida albicans" vol. 36, Jul. 5, 1996, pp. 2616-2618.

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